无菌技术是一套常规措施,旨在防止培养物,无菌培养基储备和其他溶液受到有害微生物(即败血症)的污染。无菌技术控制了来自环境的微生物对培养物的污染或被所处理的微生物对环境的污染的机会。由于生物学家的目标是在不引入外来生物的情况下培养微生物或真核细胞,因此无菌技术对于准确而有意义的实验至关重要。
无菌技术是在医疗护理操作过程中,保持无菌物品、无菌区域不被污染、防止病原微生物入侵人体的一系列操作技术。无菌技术作为预防医院感染的一项重要而基础的技术,医护人员必须正确熟练地掌握,在技术操作中严守操作规程,以确保病人安全,防止医源性感染的发生。
人们应该永远记住,不存在完全无菌的工作环境。但是,有许多简单的常识程序可以减少培养物污染的风险。尽管有时将这种行为称为“无菌技术”,但该术语仅在防止将任何生物引入实验室或医疗设备和试剂(例如在手术过程中)时才是适当的。
无菌操作技术主要包括两方面:
1)创造无菌的培养环境。包括提供密闭的培养容器、培养容器的灭菌、培养基的灭菌等;
2)在操作和培养过程中防止一切其它微生物的侵入的措施。包括紫外线杀菌、甲醛熏蒸、超净台的消毒与检测、操作工具、器皿灭菌、操作方法等。
无菌操作原则:
1)在执行无菌操作时,必须明确物品的无菌区和非无菌区,接种时必须穿工作服、戴工作帽,应在进无菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球将手擦干净;
2)在操作前20~30分钟要先启动超净台和紫外灯,进行接种所用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌,打开包装未使用完的器皿,不能放置后再使用,金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼3次后使用。严禁用手直接拿无菌物品,如瓶塞等,而必须用消毒的钳、镊子等;
3)从包装中取出吸管时,吸管尖部不能触及外露部位,使用吸管接种于试管或平皿时,吸管尖不能触及试管或平皿边;
4)接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作,接种细菌或样品时,吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒;
5)接种环或接种针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝,必须时还要烧到环和针与杆的连接处;
6)吸管吸取菌液或样品时,应用相应的橡皮头吸取,不得直接用口吸。倾倒平板应在超净台内操作,并且在开启和加盖瓶塞时需反复用酒精灯烧。
对于任何无菌技术,都应遵循一些一般规则:
1.关闭门窗以减少气流并防止突然移动,否则可能会干扰空气。
2.在消毒的表面上进行转移。推荐使用乙醇消毒,因为其作用迅速。如果工作台表面难以清洁,请用一块容易消毒的坚硬材料覆盖工作台。
3.仅在所有设备和材料都在可及范围内时,才开始操作。
4.尽快完成所有操作,但不要着急。
5.船只**在**短的时间内打开。
6.当容器打开时,所有工作都**在本生灯附近进行,所有燃烧器的火焰都是向上抽吸的。
7.在打开试管或瓶子时,**立即通过燃烧(请参阅下文)进行加热,使容器保持在尽可能接近水平的位置,以使空气从容器中向外排出。
8.在进行皮氏培养皿操作时,应将无菌内表面暴露在空气中。
9.不得触摸将要移入培养物或无菌容器的无菌移液器零件,或使其与其他非无菌表面接触,例如衣物,工作区域表面或瓶子/试管的外部。
10.与微生物接触的所有物品在每次暴露之前和之后都**进行消毒。这可以由技术团队在完成一项实际工作后进行准备和清理(例如,对于要使用的玻璃器皿),也可以由工作人员在进行实际工作期间进行(例如,对火炉进行燃烧)。线环)。